对于泰国三代试管婴儿过程中的受精方法，常用的是二代试管婴儿技术-卵胞浆内单精子注射(ICSI)，而精子的获取方式则包括手淫和外科取精。为了方便治疗并避免重复的取精手术，精子通常会进行冷冻保存，并在以后的ICSI手术中使用。无精症患者的外科手术包括附睾穿刺取精(PESA)、显微附睾取精术(MESA)、睾丸穿刺取精术(TESA)和睾丸活检术(TESE)等。一些国外研究表明，使用新鲜附睾精子或冷冻解冻附睾精子对受精率和临床妊娠率没有显著差异。对于冷冻保存的附睾精子来说，其受精率与新鲜精子相当（新鲜精子为72%，解冻精子为74%），但临床妊娠率有所降低(64. 3% vs46. 4%)。使用冷冻保存的睾丸精子时，受精率和临床妊娠率也没有差异。研究还发现，在非梗阻性无精症(NOA)患者中，使用新鲜精子或冷藏解冻的睾丸精子对受精率、妊娠率和着床率都没有显著差异（使用新鲜精子或冷藏解冻的睾丸精子时，受精率分别为59%和61%，妊娠率分别为26. 7%和21. 7%，着床率分别为12. 5%和8. 5%）。

        另外，Habermann等的研究结果也表明，在梗阻性无精症(A)或非梗阻性无精症(NOA)患者中，无论是使用新鲜的还是冷藏解冻的精子，以及使用附睾精子还是睾丸精子，所有参数结果都没有差异。一项研究涉及13对夫妇，同时接受两种治疗方案。其中一种方案采用新鲜睾丸精子进行注射，另一种方案则使用从原TESE程序中提取并经冷藏解冻的精子进行连续循环。结果显示，这两种方案的受精率和妊娠率并没有受到显著损害。尽管冷冻保存确实会对精子的运动性造成损害，但该研究仍获得了以上结论。不考虑活检的组织学诊断情况下，附睾精子和睾丸精子都可以成功进行冷冻保存。在NOA患者中，尽管取精率较低，但使用解冻精子后的ICSI结果与新鲜精子相似。因此，在对患者配偶进行卵巢刺激前，可以选择性地进行外科取精。这种方式尤其适用于那些无法使用捐精者提供的备用精子的夫妇，以避免过度的卵巢刺激。然而，在某些患者的睾丸活检中只能发现极少量的精子。